Comet Assay: Mbinu Nyeti ya Kugundua Uharibifu na Urekebishaji wa DNA

Comet Assay (Single Cell Gel Electrophoresis, SCGE) ni mbinu nyeti na ya haraka ambayo kimsingi hutumika kugundua uharibifu na ukarabati wa DNA katika seli moja moja. Jina "Comet Assay" linatokana na umbo la tabia-kama comet linaloonekana katika matokeo: kiini cha seli huunda "kichwa," wakati vipande vya DNA vilivyoharibiwa huhamia, na kuunda "mkia" unaofanana na comet.

Kanuni

Kanuni ya Uchunguzi wa Comet inategemea uhamishaji wa vipande vya DNA kwenye uwanja wa umeme. DNA isiyobadilika hubakia ndani ya kiini cha seli, huku DNA iliyoharibika au iliyogawanyika ikihamia kwenye anodi, na kutengeneza “mkia” wa comet. Urefu na ukubwa wa mkia ni sawia moja kwa moja na kiwango cha uharibifu wa DNA.

Utaratibu

1. Maandalizi ya seli: Seli za kujaribiwa huchanganywa na agarose ya kiwango cha chini myeyuko na kuenea kwenye slaidi za darubini ili kuunda safu inayofanana.
2. Lysis ya seli: Slaidi zimetumbukizwa katika suluhu ya lisisi ili kuondoa utando wa seli na utando wa nyuklia, ikifichua DNA.
3. Electrophoresis: Slaidi zimewekwa kwenye chumba cha electrophoresis chini ya hali ya alkali au neutral. Vipande vya DNA vilivyoharibiwa huhamia kuelekea electrode nzuri chini ya ushawishi wa uwanja wa umeme.
4. Madoa: Baada ya electrophoresis, slaidi hutiwa rangi ya fluorescent (kwa mfano, ethidiamu bromidi) ili kuibua DNA.
5. Uchambuzi wa Microscopic: Kwa kutumia darubini ya fluorescence au programu maalum, maumbo ya comet huchanganuliwa, na vigezo kama vile urefu wa mkia na ukubwa hupimwa.

Picha kutoka kwa biorender

Uchambuzi wa Data

Matokeo kutoka kwa Comet Assay yanatathminiwa kulingana na vigezo kadhaa muhimu:

• Urefu wa Mkia: Inawakilisha umbali ambao DNA huhama, ikionyesha kiwango cha uharibifu wa DNA.
• Maudhui ya DNA ya Mkia: Asilimia ya DNA inayohamia kwenye mkia, ambayo hutumiwa mara nyingi kama kipimo cha kiasi cha uharibifu wa DNA.
• Olive Tail Moment (OTM): Inachanganya urefu wa mkia na maudhui ya DNA ya mkia ili kutoa kipimo cha kina zaidi cha uharibifu wa DNA.

Maombi

1. Mafunzo ya Genotoxicity: Uchunguzi wa Comet hutumiwa sana kutathmini athari za kemikali, dawa na mionzi kwenye DNA ya seli, na kuifanya kuwa zana muhimu ya kupima sumu ya genotoxicity.
2. Toxicology ya Mazingira: Husaidia katika kuchanganua athari za uchafuzi wa mazingira kwenye DNA ya viumbe, kutoa maarifa kuhusu usalama wa mfumo ikolojia.
3. Utafiti wa Kimatibabu na Kitabibu: Uchunguzi wa Comet hutumiwa katika kusoma mbinu za kurekebisha DNA, saratani, na magonjwa mengine yanayohusiana na DNA. Pia hutathmini athari za matibabu ya saratani kama vile radiotherapy na chemotherapy kwenye DNA.
4. Sayansi ya Chakula na Kilimo: Hutumika kutathmini usalama wa viuatilifu, viungio vya chakula, na vitu vingine, na kuchunguza athari zake za sumu katika mifano ya wanyama.

Faida

• Unyeti wa Juu: Uwezo wa kugundua viwango vya chini vya uharibifu wa DNA.
• Uendeshaji Rahisi: Mbinu hiyo ni ya moja kwa moja, na kuifanya kufaa kwa uchunguzi wa juu wa matokeo.
• Programu pana: Inaweza kutumika kwa aina mbalimbali za seli, ikiwa ni pamoja na seli za wanyama na mimea.
• Changamoto za Quantification: Wakati wa kutoa data ya ubora kuhusu uharibifu wa DNA, uchanganuzi wa kiasi unategemea sana programu na mbinu za uchanganuzi wa picha.
• Masharti ya Majaribio: Matokeo yanaweza kuathiriwa na mambo kama vile muda wa electrophoresis na pH, inayohitaji udhibiti makini wa hali za majaribio.

Mapungufu

Comet Assay ni zana muhimu sana katika utafiti wa matibabu, sayansi ya mazingira, na ukuzaji wa dawa kwa sababu ya kubadilika kwake na unyeti wa juu katika kugundua uharibifu na ukarabati wa DNA. Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Bioteknolojia)inatoa usawa electrophoresis chumba kwa comet assay. Karibu uwasiliane nasi ili kujadiliana kuhusuUchunguzi wa Cometitifaki.

Beijing Liuyi Bioteknolojia Co. Ltd (Liuyi Bioteknolojia) ina maalumu katika utengenezaji wa vyombo vya electrophoresis kwa zaidi ya miaka 50 na timu yetu ya kitaalamu ya kiufundi na kituo cha R & D. Tunayo mstari wa uzalishaji wa kuaminika na kamili kutoka kwa muundo hadi ukaguzi, na ghala, pamoja na usaidizi wa uuzaji. Bidhaa zetu kuu ni Electrophoresis Cell (tank/chumba), Electrophoresis Power Supply, Blue LED Transilluminator, UV Transilluminator, Gel Image & Analysis System nk. Pia tunasambaza vifaa vya maabara kama vile PCR, mixer vortex na centrifuge kwa ajili ya maabara.

Ikiwa una mpango wowote wa ununuzi wa bidhaa zetu, tafadhali usisite kuwasiliana nasi. Unaweza kututumia ujumbe kwa barua pepe[barua pepe imelindwa]au[barua pepe imelindwa], au tafadhali tupigie kwa +86 15810650221 au ongeza Whatsapp +86 15810650221, au Wechat: 15810650221.

Tafadhali Changanua msimbo wa QR ili kuongeza kwenye Whatsapp au WeChat.