Gel electrophoresis ni mojawapo ya mbinu kuu zinazotumiwa katika biolojia ya molekuli kwa uchambuzi wa DNA. Njia hii inahusisha uhamiaji wa vipande vya DNA kupitia gel, ambapo hutenganishwa kulingana na ukubwa au sura. Hata hivyo, je, umewahi kukutana na makosa yoyote wakati wa majaribio yako ya electrophoresis, kama vile mikanda iliyopakwa kwenye jeli ya agarose, au hakuna mikanda kwenye jeli? Nini inaweza kuwa sababu ya makosa haya?
Mafundi wetu wamefanya muhtasari wa wanandoa wa utatuzi hapa kwa marejeleo yako.
1. Mikanda iliyopigwa kwenye gel ya agarose
●DNA iliharibiwa. Epuka uchafuzi wa viini.
● Bafa ya elektrophoresis si mpya. Baada ya matumizi ya mara kwa mara ya buffer ya electrophoresis, nguvu ya ionic hupungua, na thamani yake ya pH huongezeka, hivyo uwezo wa buffer hupungua, ambayo huathiri athari ya electrophoresis. Inashauriwa kuchukua nafasi ya buffer ya electrophoresis mara kwa mara.
● Hali zisizofaa za electrophoresis zilitumiwa. Usiruhusu voltage kuzidi 20 V / cm, na kudumisha joto la <30 ° C wakati wa electrophoresis. Kwa electrophoresis kubwa ya DNA, halijoto inapaswa kuwa chini ya 15° C. Angalia bafa ya elektrophoresis ina uwezo wa kutosha wa bafa.
● DNA nyingi sana zilipakiwa kwenye jeli. Punguza kiasi cha DNA.
● Chumvi nyingi katika DNA. Tumia mvua ya ethanoli ili kuondoa chumvi nyingi mapema.
● DNA ilikuwa na protini. Tumia dondoo za phenoli ili kuondoa protini katika hali ya juu.
● DNA ilibadilishwa. Usifanye joto kabla ya electrophoresis. Punguza DNA katika bafa na 20 mm NaCl.
2. Matatizo ya uhamiaji wa bendi ya DNA
● Urekebishaji upya wa tovuti ya COS ya kipande cha λHind III. Joto DNA kwa dakika 5 chini ya 65° C kabla ya electrophoresis, na kisha ipoe kwenye kitengo cha barafu kwa dakika 5.
● Hali zisizofaa za electrophoresis zilitumiwa. Usiruhusu voltage kuzidi 20 V / cm, na kudumisha joto la <30 ° C wakati wa electrophoresis. Angalia bafa ya electrophoresis ina uwezo wa kutosha wa bafa.
● DNA ilibadilishwa. Usifanye joto kabla ya electrophoresis. Punguza DNA katika bafa na 20 mm NaCl.
3. Mikanda ya DNA iliyozimia au kutokuwepo kwenye jeli ya agarose
● Kulikuwa na kiasi cha kutosha au mkusanyiko wa DNA iliyopakiwa kwenye jeli. Kuongeza kiasi cha DNA. Electrophoresis ya jeli ya Polyacrylamide ni nyeti zaidi kidogo kuliko elektrophoresis ya agarose, na upakiaji wa sampuli unaweza kupunguzwa ipasavyo.
● DNA iliharibiwa. Epuka uchafuzi wa viini.
● DNA ilitolewa kwa umeme kutoka kwenye jeli. Electrophorese gel kwa muda mfupi, tumia voltage ya chini, au tumia asilimia ya juu ya gel.
● Chanzo cha mwanga cha W kisichofaa kilitumika kwa taswira ya DNA iliyo na madoa ya ethidium bromidi. Tumia mwanga wa wimbi fupi (254 nm) W kwa usikivu zaidi.
4. Mikanda ya DNA haipo
●DNA ya ukubwa mdogo ilitolewa kwa umeme kutoka kwa gel. Electrophorese gel kwa muda mfupi, tumia voltage ya chini, au tumia asilimia ya juu ya gel.
● Ni vigumu kutofautisha mikanda ya DNA ya molekuli sawa. Ongeza muda wa electrophoresis, na uangalie mkusanyikoya gel ili kuhakikisha kwa usahihi asilimia ya gel itatumika.
● DNA ilibadilishwa. Usifanye joto kabla ya electrophoresis. Punguza DNA katika bafa na 20 mm NaCl.
● Nyuzi za DNA ni kubwa, na electrophoresis ya gel ya kawaida haifai. Kuchambua juu ya electrophoresis ya gel ya pulse.Ni masuala gani mengine umekuwa nayo na electrophoresis ya gel ya agarose? Tutafanya utafiti zaidi kwa miongozo katika siku zijazo.
Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltd (Liuyi Biotech) ni kampuni maalumu inayoangazia bidhaa zinazohusiana na electrophoresis nchini China. Hadithi yake inaanza mwaka 1970 wakati China ilikuwa bado haijaingia kwenye mageuzi na kufungua muda. Kupitia maendeleo ya miaka, Liuyi Bitotech ina chapa yake, ambayo inajulikana kama Chapa ya Liuyi katika soko la ndani la bidhaa za electrophoresis.
Chapa ya Liuyi ina historia ya zaidi ya miaka 50 nchini China na kampuni inaweza kutoa bidhaa dhabiti na za ubora wa juu kote ulimwenguni. Kupitia maendeleo ya miaka, inastahili chaguo lako!
Seli za mlalo za elektrophoresis (mizinga/vyumba) vya Liuyi Biotech ni za ubora wa juu na mwonekano mzuri. Kwa ukubwa tofauti wa trei za jeli, zinaweza kukidhi mahitaji yako tofauti ya majaribio. Tuna timu yetu ya kiufundi na kiwanda. Kutoka kwa muundo hadi utengenezaji, malighafi hadi sehemu muhimu, tunaweza kudhibiti mchakato mzima. Mfululizo wa DYCP 31 ni wa DNA electrophoresis, ambayo ni mfanoDYCP-31BN, DYCP-31CN,DYCP-31DN, naDYCP-31E. Tofauti kati yao ni saizi ya gel na bei. Tunatoa saizi kamili za bidhaa kwa wateja wetu. MfanoDYCP-32Cinaweza kufanya gel kubwa zaidi 250mm * 250mm.
Wakati huo huo, tunapendekeza ugavi wetu wa umeme wa electrophoresisDYY-6C,DYY-6DnaDYY-10Ckwa seli zetu za electrophoresis (mizinga / vyumba) DYCP-31 na 32 mfululizo.
Ikiwa ungependa maelezo zaidi kuhusu bidhaa, tafadhali tembelea tovuti hii ili kupata zaidi, na karibu kuwasiliana nasi kupitia barua pepe ili utufahamishe unachotaka, na uone kama tunaweza kukupa masuluhisho.
Kwa habari zaidi kuhusu sisi, tafadhali wasiliana nasi kwa barua pepe[barua pepe imelindwa], [barua pepe imelindwa].
Muda wa kutuma: Mei-09-2022