Kuboresha Gel Electrophoresis: Mbinu Bora za Sampuli ya Kiasi, Voltage, na Muda

Utangulizi

Gel electrophoresis ni mbinu ya msingi katika biolojia ya molekuli, inayotumiwa sana kwa mgawanyo wa protini, asidi ya nucleic, na macromolecules nyingine. Udhibiti sahihi wa kiasi cha sampuli, volti, na wakati wa elektrophoresis ni muhimu ili kufikia matokeo sahihi na yanayoweza kurudiwa.Mwenzetu wa maabara hutoambinu bora za kudhibiti vigezo hivi wakati wa elektrophoresis ya jeli ya SDS-PAGE.

3

Beijing Liuyi Biotechnology gel electrophoresis bidhaa

Kiasi cha Sampuli: Kuhakikisha Uthabiti

Wakati wa kutekeleza electrophoresis ya SDS-PAGE, kiasi cha sampuli ni jambo muhimu ambalo linaweza kuathiri kwa kiasi kikubwa azimio la matokeo yako. Inapendekezwa kwa ujumla kupakia 10 µL ya jumla ya protini kwa kila kisima. Ili kuhakikisha uthabiti na kuzuia uenezaji wa sampuli kati ya visima vilivyo karibu, ni muhimu kupakia kiasi sawa cha buffer ya upakiaji 1x kwenye visima vyovyote tupu. Tahadhari hii husaidia kuzuia kuenea kwa sampuli kwenye njia za jirani, ambayo inaweza kutokea ikiwa kisima kitaachwa tupu.

Kabla ya kupakia sampuli zako, kila mara anza kwa kuongeza alama ya uzito wa molekuli kwenye kisima kimoja. Hii inaruhusu kutambua kwa urahisi ukubwa wa protini baada ya electrophoresis.

1

Udhibiti wa Voltage: Kusawazisha Kasi na Azimio

Voltage inayotumika wakati wa electrophoresis huathiri moja kwa moja kasi ambayo sampuli huhamia kupitia gel na azimio la kujitenga. Kwa SDS-PAGE, ni vyema kuanza na voltage ya chini ya karibu 80V. Voltage ya awali ya chini huruhusu sampuli kuhama polepole na sawasawa, zikizizingatia kwenye bendi kali wakati zinapoingia kwenye gel ya kutenganisha.

Mara tu sampuli zimeingia kikamilifu kwenye gel ya kutenganisha, voltage inaweza kuongezeka hadi 120V. Voltage hii ya juu huharakisha uhamaji, na kuhakikisha kwamba protini zimetenganishwa kwa ufanisi kulingana na uzito wao wa molekuli. Ni muhimu kufuatilia maendeleo ya mbele ya rangi ya bluu ya bromophenol, ambayo inaonyesha kukamilika kwa electrophoresis. Kwa gel yenye mkusanyiko wa 10-12%, dakika 80-90 ni kawaida ya kutosha; hata hivyo, kwa gel 15%, unaweza kuhitaji kupanua muda wa kukimbia kidogo.

Usimamizi wa Wakati: Kujua Wakati wa Kuacha

Muda ni sababu nyingine muhimu katika electrophoresis ya gel. Kuendesha gel kwa muda mrefu sana au mfupi sana kunaweza kusababisha utengano mdogo. Uhamiaji wa rangi ya bluu ya bromophenol ni kiashiria muhimu: inapofikia chini ya gel, kwa kawaida ni wakati wa kuacha kukimbia. Kwa geli za kawaida, kama vile 10-12%, muda wa electrophoresis wa dakika 80-90 kawaida hutosha. Kwa asilimia kubwa ya jeli, kama 15%, muda wa kukimbia unapaswa kuongezwa ili kuhakikisha utengano kamili wa protini.

Usimamizi wa Bafa: Kutumia tena na Kutayarisha Vibafa

Bafa ya Electrophoresis inaweza kutumika tena mara 1-2, kulingana na hali maalum ya maabara yako. Walakini, kwa matokeo bora, inashauriwa kuandaa bafa safi ya 10x na kuipunguza kabla ya matumizi. Hii inahakikisha kwamba buffer hudumisha ufanisi wake, na kusababisha matokeo ya kuaminika zaidi ya electrophoresis.

2

Beijing Liuyi Biotechnology gel electrophoresis bidhaa

Kwa kudhibiti kwa uangalifu kiasi cha sampuli, voltage, na wakati wa electrophoresis, unaweza kuboresha kwa kiasi kikubwa usahihi na uzalishaji wa matokeo ya electrophoresis ya gel yako. Utekelezaji wa mbinu hizi bora katika kazi yako ya maabara itakusaidia kufikia mikanda iliyo wazi na tofauti zaidi, na hivyo kusababisha data bora kwa uchanganuzi wa mkondo wa chini.

Ikiwa una mbinu nzuri zaidi za kuboresha majaribio ya gel electrophoresis, karibu ujadiliane nasi!

Beijing Liuyi Bioteknolojia Co. Ltd (Liuyi Bioteknolojia) ina maalumu katika utengenezaji wa vyombo vya electrophoresis kwa zaidi ya miaka 50 na timu yetu ya kitaalamu ya kiufundi na kituo cha R & D. Tunayo mstari wa uzalishaji wa kuaminika na kamili kutoka kwa muundo hadi ukaguzi, na ghala, pamoja na usaidizi wa uuzaji. Bidhaa zetu kuu ni Electrophoresis Cell (tank/chumba), Electrophoresis Power Supply, Blue LED Transilluminator, UV Transilluminator, Gel Image & Analysis System nk. Pia tunasambaza vifaa vya maabara kama vile PCR, mixer vortex na centrifuge kwa ajili ya maabara.

Ikiwa una mpango wowote wa ununuzi wa bidhaa zetu, tafadhali usisite kuwasiliana nasi. Unaweza kututumia ujumbe kwa barua pepe[barua pepe imelindwa]au[barua pepe imelindwa], au tafadhali tupigie kwa +86 15810650221 au ongeza Whatsapp +86 15810650221, au Wechat: 15810650221.

Tafadhali Changanua msimbo wa QR ili kuongeza kwenye Whatsapp au WeChat.

2


Muda wa kutuma: Aug-20-2024