Tulishiriki mambo kadhaa ya kuzingatia wiki iliyopita kwa kutumia electrophoresis ya membrane ya selulosi acetate, na tutamaliza mada hii hapa leo kwa marejeleo yako.
Uteuzi wa Mkazo wa Buffer
Kikolezo cha bafa kinachotumiwa katika elektrophoresis ya membrane ya selulosi ya acetate kwa ujumla ni ya chini kuliko ile inayotumiwa katika electrophoresis ya karatasi. pH inayotumika sana 8.6Barbital buffer kwa kawaida huchaguliwa ndani ya kiwango cha 0.05 mol/L hadi 0.09 mol/L. Wakati wa kuchagua mkusanyiko, uamuzi wa awali unafanywa. Kwa mfano, ikiwa urefu wa ukanda wa membrane kati ya electrodes katika chumba cha electrophoresis ni 8-10cm, voltage ya 25V inahitajika kwa sentimita ya urefu wa membrane, na kiwango cha sasa kinapaswa kuwa 0.4-0.5 mA kwa sentimita ya upana wa membrane. Ikiwa maadili haya hayapatikani au kuzidi wakati wa electrophoresis, mkusanyiko wa buffer unapaswa kuongezeka au kupunguzwa.
Mkusanyiko wa bafa ya chini sana itasababisha harakati za haraka za bendi na kuongezeka kwa upana wa bendi. Kwa upande mwingine, ukolezi wa juu zaidi wa bafa utapunguza kasi ya uhamiaji wa bendi, na kufanya iwe vigumu kutofautisha bendi fulani za utengano.
Ikumbukwe kwamba katika electrophoresis ya membrane ya acetate ya selulosi, sehemu kubwa ya sasa inafanywa kwa njia ya sampuli, ambayo hutoa kiasi kikubwa cha joto. Wakati mwingine, mkusanyiko uliochaguliwa wa bafa unaweza kuchukuliwa kuwa unafaa. Hata hivyo, chini ya hali ya ongezeko la joto la mazingira au wakati wa kutumia voltage ya juu, uvukizi wa maji kutokana na joto unaweza kuongezeka, na kusababisha mkusanyiko wa juu wa bafa na hata kusababisha utando kukauka.
Sampuli ya Kiasi
Katika electrophoresis ya membrane ya selulosi ya acetate, kiasi cha kiasi cha sampuli imedhamiriwa na mambo mbalimbali, ikiwa ni pamoja na hali ya electrophoresis, mali ya sampuli yenyewe, mbinu za kuchafua, na mbinu za kugundua. Kama kanuni ya jumla, kadri mbinu ya ugunduzi inavyoweza kuwa nyeti zaidi, ndivyo kiasi cha sampuli kinaweza kuwa kidogo, ambacho ni cha manufaa kwa utenganisho. Ikiwa sampuli ya ujazo ni nyingi kupita kiasi, mifumo ya utenganisho wa kielektroniki inaweza isiwe wazi, na uwekaji madoa pia unaweza kuchukua muda. Hata hivyo, wakati wa kuchanganua kwa kiasi mikanda iliyotenganishwa kwa kutumia mbinu za utambuzi wa rangi ya elution, kiasi cha sampuli haipaswi kuwa kidogo sana, kwani kinaweza kusababisha viwango vya chini vya ufyonzaji wa vipengee fulani, hivyo kusababisha makosa ya juu zaidi katika kukokotoa maudhui yake. Katika hali kama hizi, kiasi cha sampuli kinapaswa kuongezeka ipasavyo.
Kwa kawaida, kiasi cha sampuli kinachoongezwa kwenye kila sentimita ya sampuli ya mstari wa maombi huanzia 0.1 hadi 5 μL, sawa na kiasi cha sampuli cha 5 hadi 1000 μg. Kwa mfano, katika uchanganuzi wa electrophoresis ya protini ya seramu ya kawaida, kiasi cha sampuli kinachoongezwa kwenye kila sentimita ya mstari wa maombi kwa ujumla hakizidi 1 μL, sawa na 60 hadi 80 μg ya protini. Walakini, wakati wa kuchambua lipoproteini au glycoproteini kwa kutumia njia sawa ya elektrophoresis, kiasi cha sampuli kinahitaji kuongezwa sawasawa.
Kwa kumalizia, kiasi cha sampuli kinachofaa zaidi kinapaswa kuchaguliwa kulingana na hali maalum kupitia mfululizo wa majaribio ya awali.
Uteuzi wa Suluhisho la Madoa
Mikanda iliyotenganishwa katika electrophoresis ya membrane ya selulosi acetate hutiwa madoa kabla ya kugunduliwa. Vipengee tofauti vya sampuli vinahitaji mbinu tofauti za uwekaji madoa, na mbinu za upakaji madoa zinazofaa kwa electrophoresis ya membrane ya selulosi ya acetate huenda zisitumike kabisa kwa karatasi ya kuchuja.
Kuna kanuni tatu kuu za kuchagua suluhisho la madoaselulosi acetate membrane. Kwanza,Rangi zenye mumunyifu katika maji zinapaswa kupendelewa zaidi ya rangi zinazoyeyuka na pombe ili kuzuia kupungua kwa utando na ubadilikaji unaosababishwa na myeyusho wa madoa wa mwisho. Baada ya uchafu, ni muhimu suuza utando na maji na kupunguza muda wa uchafu. Vinginevyo, utando unaweza kujikunja au kusinyaa, jambo ambalo litaathiri ugunduzi unaofuata.
Pili, ni vyema kuchagua dyes zilizo na mshikamano mkali wa madoa kwa sampuli. Katika electrophoresis ya membrane ya selulosi ya acetate ya protini za seramu, amino nyeusi 10B hutumiwa kwa kawaida kwa sababu ya mshikamano wake mkubwa wa madoa kwa vipengele mbalimbali vya protini za seramu na uthabiti wake.
Tatu, dyes za ubora wa kuaminika zinapaswa kuchaguliwa. Baadhi ya rangi, licha ya kuwa na jina moja, inaweza kuwa na uchafu unaosababisha mandharinyuma meusi baada ya kubadilika rangi. Hii inaweza hata kutia ukungu bendi zilizotenganishwa vizuri awali, na kuzifanya kuwa ngumu kutofautisha.
Hatimaye, uchaguzi wa mkusanyiko wa ufumbuzi wa uchafu ni muhimu. Kinadharia, inaweza kuonekana kuwa mkusanyiko wa suluhisho la madoa juu zaidi ungesababisha uwekaji madoa zaidi wa vijenzi vya sampuli na matokeo bora ya upakaji madoa. Hata hivyo, hii sivyo. Uhusiano wa kumfunga kati ya vipengele vya sampuli na rangi ina kikomo fulani, ambacho hakiongezi na ongezeko la mkusanyiko wa ufumbuzi wa madoa. Kinyume chake, mkusanyiko wa suluhisho la madoa kupita kiasi sio tu kupoteza rangi lakini pia hufanya iwe ngumu kufikia msingi wazi. Zaidi ya hayo, nguvu ya rangi inapofikia thamani fulani ya juu, mkunjo wa kunyonya wa rangi haufuati uhusiano wa mstari, hasa katika vipimo vya kiasi.Katika electrophoresis ya membrane ya selulosi, mkusanyiko wa suluhisho la madoa kwa ujumla ni chini kuliko ile inayotumiwa katika electrophoresis ya karatasi.
Maelezo ya kujua kuhusu Beijing Liuyi Bioteknolojia's selulosi acetate membranetank ya electrophoresis na matumizi yake ya electrophoresis, tafadhali tembelea hapa:
lMajaribio ya kutenganisha protini ya seramu kwa Membrane ya Selulosi Acetate
lSelulosi ya Acetate Membrane Electrophoresis
lMazingatio Kadhaa Yanafaa Kuwekwa Akilini Unapotumia Selulosi Acetate Membrane Electrophoresis (1)
Ikiwa una mpango wowote wa ununuzi wa bidhaa zetu, tafadhali usisite kuwasiliana nasi. Unaweza kututumia ujumbe kwa barua pepe[barua pepe imelindwa]au[barua pepe imelindwa], au tafadhali tupigie kwa +86 15810650221 au ongeza Whatsapp +86 15810650221, au Wechat: 15810650221.
Rejeleo:Electrophoresis(toleo la pili) la Bw. Li
Muda wa kutuma: Juni-06-2023